化(huà)學實驗室檢測方法的(de)驗證與确認的(de∑φ₹♥)參數(shù)
2018-07-26
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檢測方法的(de)驗證與确認的(de)參數(shù®✔✔¥)
化(huà)學檢測的(de)對(duì)象即分(×±fēn)析的(de)目标化(huà)合物(wù)按照(zhào)性質α∞可(kě)以分(fēn)為(wèi)不(bù♥↕¥)得(de)檢出的(de)物(wù)質 (禁λ✘用(yòng)物(wù)質) 、限制(zhì)使用(yòng)的β®α(de)物(wù)質 (已制(zhì)定最高(gāo)允許殘留限量¥<™物(wù)質) 和(hé)無限制(zhì)使用(yòng)物 '(wù)質這(zhè)三類。因此, 在對(duì×✘)化(huà)學檢測方法進行(xíng)驗證和(hé)确認過程中制(z&¶±hì)訂相(xiàng)關技(jì)術(shφ₹™§ù)指标的(de)試驗方案及結果評價時(shí), 也(yě)應充分(fē≥$n)考慮這(zhè)三類物(wù)質的(de)不(bù)同特性來(lái)控制Ωβ(zhì)執行(xíng)。國(guó)際部分(fēn)技∏>'(jì)術(shù)組織針對(duì)化(huà)學檢測實驗室的(d•₩e)方法驗證與确認都(dōu)提出了(le)相(xiàng)關的(de)技δ∞★(jì)術(shù)要(yào)求, GB/T2✘≠7404-2008标準等文(wén)件(jΩ$iàn)也(yě)給出方法确認與驗證可(kě)參考§Ω的(de)技(jì)術(shù)參數(shù)。從(cóng)方法驗證與确認參φ£₽數(shù)的(de)科(kē)學性和(hé)有(yǒu)效性論證角度看(k ÷àn), 化(huà)學檢測方法驗證的(de)技(jì)術(shù)指标可(±♠×kě)分(fēn)為(wèi)方法的(de)校(xiào)準曲線、回收率、精₹∏♥<密度、準确度 (正确度) 試驗。而非标方©δ法的(de)确認技(jì)術(shù)指标除了(le)方法的(de)校( εxiào)準曲線、回收率、精密度、準确度 (正确度✔∑§•) 試驗以外(wài), 還(hái)需要(yào)進行(xí∑₹™ng)方法的(de)特異性、耐用(yòng)性和(hé)測量不(bù)确定度評π♥>估等确認。
1 方法的(de)校(xiào)準曲線
實驗室認可(kě)的(de)實驗室應确定檢測方法校(xiào)準曲線的(de)數(shù)學•φ♣方程以及校(xiào)準曲線的(de)工(gōng)作(zuò)範圍, ©∑濃度範圍盡可(kě)能(néng)覆蓋一(yī)個(≠☆↕>gè)數(shù)量級, 至少(shǎo)作(zuò)5個(gè)點 (不ε✘(bù)包括空(kōng)白(bái)) 。對(du&÷<ì)于篩選方法 (即指定性方法或半定量方 ™β•法) , 方法線性回歸方程的(de)相(xiàng)關系數Ω☆✘(shù)不(bù)應低(dī)于0.98, 對($ δduì)于确證方法 (即能(néng)準确定量的(de)方πσ 法) , 方法線性回歸方程的(de)相(xiàng)關系數™☆¶(shù)不(bù)應低(dī)于0.99。測試溶液♠∏♣✔中被測組分(fēn)濃度必須在校(xiào)π•準曲線的(de)線性範圍內(nèi)。
2 方法的(de)回收率
方法的(de)回收率代表了(le)測試人(rén)員(yuán)操作(↑&πzuò)檢測過程所獲得(de)測試結果的(de)準确性。考慮到(dào♥∞§)被測物(wù)的(de)濃度水(shuǐ)平會(huì)影(yǐng)響 ↑λ≥到(dào)回收率試驗結果的(de)高(gāo)低(dī ∞), 因此, 在進行(xíng)方法的(de)回收率驗證試驗時(shí)±♥, 對(duì)于禁用(yòng)物(w ≈ù)質, 回收率應在方法測定低(dī)限₩™ (LOD) 、兩倍方法測定低(dī)限和(hé)十倍方✘Ω¥€法測定低(dī)限進行(xíng)三水(sh£€πβuǐ)平試驗;對(duì)已制(zhì)≈£ε定最高(gāo)殘留限量MRL的(de)最大(dà)化(hπ∞★uà)學殘留量, 回收率應在方法LOD、MRL、選一(ε↔yī)合适點進行(xíng)三水(shuǐ)平試驗≤♣÷;對(duì)于未制(zhì)定MRL的(de), 回收率應在方法LO↔★↔'D、常見(jiàn)限量指标、選一(yī)合适點進行(xíng)三水(✔÷shuǐ)平試驗。每一(yī)水(shuǐ)平做(∞♠¥zuò)雙平行(xíng)。可(kě)參考表1給出的(de)數( α∑shù)據進行(xíng)回收率結果的(de)評價。α♥≠$
表1.回收率可(kě)接受範圍
3 方法的(de)精密度
方法的(de)精密度代表了(le)測試人(rén)員(yuán)操作 ✘(zuò)檢測過程所獲得(de)測試結果的(de)穩定水(shuǐ)平。←α↕在進行(xíng)方法的(de)精密度驗證試驗時(shí), 對(du'<σì)于禁用(yòng)物(wù)質, 精密度"₩試驗應在LOD、兩倍LOD和(hé)十倍LOD三★≠個(gè)水(shuǐ)平進行(xíng);對(duì)于已制(zhì)定M☆•δ RL的(de), 精密度試驗應在LOD、MRL、選一(yī)合∏×π适點三個(gè)水(shuǐ)平進行(xíng);對×ε₩←(duì)于未制(zhì)定MRL的(de), 精密度試驗應在λ₹LOD、常見(jiàn)限量指标、選一(yī)合适點三個(gè)水(sα↔ ®huǐ)平進行(xíng)。每一(yī)濃度水(shuǐ→∑)平的(de)重複測定次數(shù)>6。精密度測試的(δ♦Ωde)結果可(kě)通(tōng)過實驗室內(nèi)的(d♠וe)變異系數(shù) (CV=标準偏差/平均值) 來(l∑÷≤ái)表達, 标準偏差s可(kě)通(tōng)過貝塞爾♦↓↔Bessel公式計(jì)算(suàn)得(de©®)到(dào), 并可(kě)參考表2給出的(de)≤∞數(shù)據進行(xíng)精密度結果的(₩♥de)評價。
表2.實驗室內(nèi)變異系數(shù)
4 方法的(de)準确度
方法的(de)準确度又(yòu)可(kě)稱為(wèi)方法的(de)↑∑正确度, 指的(de)是(shì)重複分(fēn)析标準物(wù® §)質 (實物(wù)标樣) 或水(shuǐ)平測試樣品, 測定的(de™")含量經回收率校(xiào)正後, 得(de)出測定值與真值的(de)偏差範圍¥ ↔✔。可(kě)參考表3給出的(de)數(shù)據進行(xíng★₹)準确度結果的(de)評價。
表3.實驗室內(nèi)變異系數(shùα ∑)
5 方法的(de)特異性
實驗室在使用(yòng)非标方法、實驗室設計(jì) ↓≈(制(zhì)定) 的(de)方法、超出其預定範 ♥₹δ圍使用(yòng)的(de)标準方法、擴充和(hé)修改過的(de)标準方法時¥&(shí), 有(yǒu)必要(yào)對(duì)使用(yòng)方法的(dβ∏₹e)特異性進行(xíng)确認, 因為(wèi)僅僅基于色譜 分(fēn)析的(de)技(jì)術(shù)手段不(bù)能(λ₩♦∑néng)準确地(dì)區(qū)分(fēn)同一(λ☆≈yī)分(fēn)子(zǐ)量的(de)物(wù)質 (同分(fēn)異β×"£構體(tǐ)) 。對(duì)于能(néng)夠準确↑€♠定量檢測的(de)方法要(yào)保證檢測的(de)結果準确性, 避免β₹Ω異構體(tǐ)結果的(de)誤判, 因此就(ji♥∏ πù)應該根據待測物(wù)的(de)化(huà)學結構信±<λ♥息、使用(yòng)分(fēn)子(zǐ)光(guāng)譜等技(jì)₩₽術(shù)才能(néng)滿足方法的(de)特異性。方法的•♦(de)特異性确認可(kě)采用(yòng)如(rú)下(xià)的(d& δe)技(jì)術(shù)手段:
1) 氣相(xiàng)色譜分(fēn)析結果再用(yòng)↕氣相(xiàng)色譜質譜分(fēn)析技(jì)術(shù)确®↓π€證;
2) 液相(xiàng)色譜分(fēn)析結果&>∑¥再用(yòng)液相(xiàng)色譜質譜分(fēn)析技(jì)術☆↕(shù)确證;
3) 免疫親和(hé)色譜分(fēn)析結果再用(yòngΩ₹)氣相(xiàng)色譜質譜分(fēn)析技(jì)術(₹ו≤shù)确證;
4) 氣相(xiàng)色譜分(fēn)析結果再用(yòng)紅(£©hóng)外(wài)光(guāng)譜分(fēn)÷© '析技(jì)術(shù)确證;
5) 液相(xiàng)色譜分(fēn)析結果再用(yòng)免疫層×Ω>析分(fēn)析技(jì)術(shù)确證。
6 方法的(de)抗幹擾性和(hé)耐用(yòng)性
實驗室采用(yòng)的(de)非标方法應具有₽Ω(yǒu)對(duì)測試過程中可(kě)影(yǐng)響測試結果因φ♣素的(de)抗幹擾能(néng)力, 當測試條件(jiàn)發生(shēnε→∏g)細小(xiǎo)變動時(shí), 方法可(kě)具有→Ω• (yǒu)一(yī)定的(de)保持測試結果不(b≈α∏ù)受影(yǐng)響的(de)耐受程度, 方法的(de)技(jì)術(sh≤₩δù)條件(jiàn)應滿足最大(dà)的(de)波動影(yǐδ≠ng)響, 并且設備、試劑、操作(zuò)過程等應具有(yǒu)盡可(kě)能 →≥→(néng)廣泛的(de)适用(yòng)性 §∞和(hé)耐用(yòng)性, 不(bù)宜具有♥✔(yǒu)嚴苛的(de)要(yào)求。
實驗室隻有(yǒu)做(zuò)好(hǎo)方法驗證和(hé)方法确₽÷→™認, 才能(néng)用(yòng)測試數(s€hù)據真實地(dì)證明(míng)實驗室使用(yòn® ₹g)标準方法的(de)操作(zuò)能(néng)力, 證明(míng)≠"£ 所使用(yòng)的(de)非标方法具有(yǒu)的(de)科(™×kē)學性、适用(yòng)性、準确性和(hé¥δ)有(yǒu)效性, 達到(dào)确保實驗室檢測結果準确無♥•β誤的(de)目的(de)。
